Terve.

Ensimmäinen oma kasvatusprojekti menossa ja inkubaatiovaiheen kontaminaation mahdollisuus pääsi hiipimään mieleen. Taustasta sen verran, että viime viikon torstai-iltana inokuloin 6 kpl 250ml juomalaseihin tehtyjä PF-Tek -kasvualustoja (1:1:2 ja muutenkin HuMyn mukaisesti). Itiölaskeuma tilattu syksyllä FSRE:stä (Equadorian), joista tein ruiskut edeltävänä päivänä. Nyt siis vajaan 5 vrk inkubaation 23°C huonelämpötilassa jälkeen lasit näyttävät allaolevilta, pahoittelen heijastuksia:

[smg id=2127]lasit 1 ja 2[smg id=2128]lasit 3 ja 4[smg id=2129]lasit 5 ja 6

En ole laseja älyttömällä pieteetillä muutaman tunnin välein tarkistellut, eilen taisin vilkaista ja en muistaakseni huomannut yhtään minkäänlaista kasvustoa. Tänään taasen valkoista lupaavan näköistä rihmastoa näyttää olevan joissain laseissa ihan kohtalaisestikin. Minkäänlaista erityistä hajua niistä en havaitse. Näillä väri- ja haju'parametreilla' kasvatustietoutta kohtalaisen paljon ennen tätä ensimmäistä omaa yritystä lukeneena minkään ei siis pitäisi omasta mielestäni viitata homekontaminaatioon, mutta tämä kehitys pisti mietityttämään lähinnä siksi, että oletin equadorilaisen olevan suhteellisen hidas kolonisoija ja vaikka luotan omaan puhdastyöskentelyyni, niin muut osa-alueet projektista tähän asti eivät ole menneet ns. aivan kuin Strömsössä; en malttanut odottaa kasvualustojen jäähtymistä yön yli, 4h jäähtymisen jälkeen ne olivat ehkä 30-40°C ja kaiken lisäksi ne vaikuttivat siltä, että vettä olisi päässyt falskaamaan sisään. Injektioportteja joutui tekemään myös 3-4 kpl / lasi, koska olin apteekista poistanut 18G-koon neulan, jonka pituus ei olisi ollut välttämättä riittävä yhdestä keskellä olevasta holesta (isosta 'kinkunsuolausneulasta' muistin lukeneeni myös negatiivisia puolia, olisi ehkä sittenkin kannattanut...). Tämän seurauksena lievä tappiomieliala pääsi hiipimään sisään eivätkä odotukset olleet enää niin korkealla. Ajattelin odottaa 15 vrk ja jos ei mitään olisi tapahtunut, niin uusi yritys olisi tullut sitten joskus aikataulujen sen taas salliessa. Bakteerikontaminaation mahdollisuuttakaan en ole pystynyt poissulkemaan. Mitään muita kuvista mielen tulevia kasvatukseen liittyviä kommentteja?

Bonuskysymyksenä kasvatukseen liittyen olisi kiva kuulla, jos jollain on kokemusta painekattilan sisään laitettavan ja lasit/purkit vedenpinnan päälle nostavana telineenä toimivan ritilän tms. askartelemisesta itse. K-Raudasta jonkinlaista verkkoa, josta napsimalla ja taittelemalla kö? Olen paremman puutteessa käyttänyt ~2cm paksuksi taittelemaa pyyhettä kattilan pohjalla lämpöshokkia estämään.

tl;dr Voiko kuvien laseissa olla kontaminaatio? 5pv inkubaatio takana ja prosessissa tapahtunut oletettavasti hidastavia kämmäyksiä. Kellään kokemusta 'painekattilaritilän' teosta itse?

Kiitos jo etukäteen mahdollisista vastauksista! Vuoden ajan täällä ehdin 'lurkata', ennen kuin oma postaaminen tuli ajankohtaiseksi.

Kiitos rauhoittavasta varmistuksesta, Sclerotia!

Hmh, kolme vuorokautta on jo aika lyhyt aika. Foliotakin voisi tosiaan varmaan käyttää apuna, lähinnä itseä mietityttää vaan se, miten lasit saisi aseteltua tukevasti siten, että niiden pohjan ja kattilan pohjan väliin jäisi esim. 5cm. Oman kattilan työpaine on vain n. 80 kPa (~11,6 psi), joten sterilointiaikojen venyessä vettäkin olen joutunut käyttämään reilummin.  Heitin painekattilaan steriloitavaksi alunperin 7 lasia, joista yksi oli traumaattisesti jotenkin päässyt aukenemaan tiukoista teippauksista huolimatta ja kasvualusta kastunut läpimäräksi. En keksinyt muuta syytä kuin että pyyhe olisi lähtenyt veden kupliessa liikehtimään levottomasti jne. No, vaikkei 6/7 onnistuminen taida ihan Six Sigma -tasoa olla, niin ei toisaalta maailmanloppukaan, heh. Nyt kun odotukset ovat taas nousseet, niin ehkä tässä jo kohtuullisia flusheja sitten aikanaan uskaltaa odottaa.

Lasit 1 ja 3 ovat luultavasti liian kosteita rihmaston kasvuun, kannattaa eristää muista kakuista jo valmiiksi. Niissä ei näy myöskään kasvustoa. Rihmasto rukka ei pääse hengittämään eikä kaivautumaan liian tiiviin pinnan lävitse. Vettä on siis luultavasti steriloinnin aikana päässyt hieman lasien sisään. Onneksi ei kaikkien! Muut kakut näyttäisivät olevan oikein hyvässä kondiksessa ja rihmastoakin on syntynyt oikein mukavasti.

Eri Cubensis -lajikkeiden kolonisoitumisajoissa ei ole mitään eroa, etenkään itiöiden kanssa (poikkeuksena voi olla kauan kloonaamalla jalostetut kannat), mutta kokonaan eri sienilajien kanssa ero voi olla jo merkittävämpikin. Nuo kolonisoitumisaikojen erot ovat lähinnä markkinointikikkoja.

Pieni vinkki steriloimiseen ja veden määrään: vettä voi lisätä kesken steriloimisen (tässä tapauksessa muista laskea paineet kattilasta ennen kannen avaamista), tai pohjalle laittaa korotuspalat (tässä vain mielikuvistus ja korkea lämpötila ovat rajana). Itse olen käyttänyt metallisia purkkeja ja juurikin suunnittelemaasi verkkoa. Verkosta siirryin purkkeihin kun värjäsi kattilan punaruskeaksi ruosteesta. Olempa jonkun kuullut käyttävän pyyhettäkin..kunhan ei vain palaisi pohjaan.

Neulaksi paras vaihtoehto on sopivan suuri metallineula, kinkunsuolausneula. Liekö se sitten se markkinoiden suurin? Yleensä injektioportteja on helpoin tehdäkin nelisen kappaletta, jotka sitten peitetään microporeteipillä kaasunvaihdon mahdollistamiseksi.

Kyllä tuosta satoa saat aikaiseksi hyvinkin jos vain pääset tämän purkin sisäisen vaiheen kunnialla loppuun.