Psilosybiini.info

Agar-viljelmästä nesteviljelmä

Poissa Mädi

  • Edesmennyt
    • Viestejä: 1 125
    • Karma: 79
    • Profiili
Tämäkin ohje on tulossa jossain vaiheessa Hullu Mykologi -oppaaseen.

Koska eberbach -välineet (http://www.fungi.com/tools/liquid.html) ovat järjettömän kalliita, päätin kokeilla miten vastaava tekniikka toimisi kotoa löytyvällä sauvasekoittimella. Siinä on irroitettava teräosa, joka kesti hyvin autoklaavissa steriloinnin. Tulokset olivat hyviä, kolonisoitumisen alkaminen oli huomattavasti nopeampaa kuin siirrettäessä agar-siivu suoraan jyviin. Jo yhdestä viljelmästä saa erittäin runsaasti nestemäistä inokulanttia. Käytin vain 3 ruiskullista ja sitä jäi todella runsaasti, yksi viljelmä ja pienempi määrä vettä olisi riittänyt helposti.

Huom! Selvitä, kestääkö sekoittimesi steriloitava osa painekeitintä. Jos siitä löytyy PP5 -merkintä (http://fi.wikipedia.org/wiki/Tiedosto:Plastic-recyc-05.svg) sen pitäisi kestää varmasti.

Edut agar-viljelmään nähden on kolonisaation alkamisnopeus ja nesteviljelmään nähden kontaminaatioiden helppo tunnistaminen. Haittana hieman lisää työtä, kuitenkin puhutaan vain noin 10-15min lisätyöstä.

Tarvikkeet
Valmiita agar-viljelmiä
Sauvasekoitin, jonka teräosa steriloitu.
Steriili skalpelli
Steriilejä neuloja ja ruiskuja
Steriloituja kasvualustoja
Purkki, jossa steriloitua vettä 1 dl. Sauvasekoittimen on mahduttava tähän purkkiin.

Valmistelin tarvikkeet.
[smg id=561]

Purkissa oli hieman ehkä liikaakin vettä.
[smg id=562]

Leikkasin agar-viljelmistä rihmastot reunoja lukuunottamatta ja laitoin ne purkkiin.
[smg id=563]

Sekoitin sisällön sauvasekoittimella.
[smg id=564]

Otin ruiskuihin liuosta.
[smg id=565]

Inokuloin purkit (noin 4ml/purkki) ja 2,5 vuorokauden kuluttua kasvua oli näkyvissä runsaasti. Vasemmanpuoleisen purkin "rähmä" on purkin ulkopuolella olevaa liimaa. Kasvustoa oli joka puolella purkkia.
[smg id=568]

Oikeanpuoleinen purkki hieman yli 7 vuorokautta inokuloinnista:
[smg id=566]

Ihan mukavia tuloksia, vielä ehkäpä aavistuksen hitaammalla P. azurescens -lajikkeella.

Litran purkit tulevat myös hyvää vauhtia perässä:
[smg id=567]

Kesän ja lämpimämmän inkubaatioympäristön tultua olen huomannut useimpien litran purkkien kolonisoituvan 5-7 päivässä kokonaan. Olen siirtynyt käyttämään 60ml lääkeruiskuja, joka helpottaa työtä oleellisesti.

Vielä loppuun lainaus tuolta Fungi Perfectin sivulta, joka pätee tähänkin tekniikkaan.
Lainaus
Eberbach Containers
Fungi Perfecti stocks Eberbach containers for devotees of the liquid inoculation technique. These containers are autoclavable. Partially fill with water, autoclave in your pressure cooker. Transfer an entire dish of mushroom mycelium into it. Place the container on a stirrer, activate, and in five seconds or less there are millions of tiny fragments of hyphae which can be transferred into sterilized grain. This technique minimizes contamination, accelerates colonization, maximizes the potential of your mycelia, and tremendously speeds up the inoculation/incubation process. The cultures and time you save will more than make the cost worthwhile. One culture grown on a 100 x 15mm petri dish can effectively inoculate 100–300 cups of grain using these stirrers! In fact, some mushroom species grow too slowly via the traditional methods of propagation, and defeat would-be spawn makers. With these stirrers, mycelium of difficult-to-grow species can be expanded quickly and efficiently. In our opinion, these stirrers are integral to any professional spawn laboratory.
« Viimeksi muokattu: Lokakuu 09, 2010, 09:21 kirjoittanut Mädi »
I haven't failed. I've just found 10,000 ways that won't work. ~ Thomas Edison


Poissa heksi

    • Viestejä: 3
    • Karma: 0
    • Profiili
Perusteellinen ja selkeä opastus, hienoa!

Hieman samaa ideaa voi agarin sijaan käyttää myös kolonisoituneisiin kakkuihin/jyviin; tällöin kanta ei tietenkään ole yhtä puhdas, mutta ainakin kolonisoituminen on nopeaa. Tässä tapauksessa myöskään sauvasekoitin ei ole välttämätön, vaan lasipurkkiin laitettu muutama lasinsiru hoitaa homman purkkia voimakkaasti ravisteltaessa. En tiedä toimisiko tämä myös agarviljelmän kanssa, vai onko liian sitkeää.